O Livro “Produção e análise de plantas transgênicas: conceitos e informações básicas” inicia com a introdução de conceitos, benefícios e aplicações da biotecnologia e do melhoramento genético clássico, bem como as vantagens, desvantagens e aplicações de ambas as tecnologias.
Na seqüência, o tema relacionado com a produção de plantas geneticamente modificadas é introduzido, citando a construção de cassetes de expressão gênica, seguido dos métodos comumente utilizados para a transformação genética de plantas, e finalizado com a utilização da técnica de cultura de tecidos vegetais como ferramenta para a regeneração e seleção dos transformantes.
A análise das Plantas transgênicas é abordada por meio da descrição das técnicas comumente utilizadas para analise de DNA, RNA e proteínas. O livro também trata da libertação experimental e comercial de plantas geneticamente modificadas, da relação entre os transgênicos e o meio ambiente e da situação e perspectivas das plantas transgênicas no Brasil.
Ao final, os autores discorrem de maneira sucinta sobre toda a temática abordada, agregando perspectivas e aplicações para os transgênicos frente aos cenários futuros.
Editora: Agrolivros Autor: Juliana Martins Ribeiro, Márcio dos Santos Teixeira Pinto, Márcia da Silva Pereira D’Isep e Eduardo Alves Gamosa de Oliveira Ano: 2012 Edição: 1ª Nº de pág: 80 Acabamento: Brochura Formato: 16x23cm ISBN: 978-85-98934-13-6
1 - Introdução Conceito, benefícios e aplicações da biotecnologia - 13 Melhoramento genético clássico e a engenharia genética - 15 Estado da arte - 16
2 - Construção de cassetes de expressão gênica O promotor - 21 Promotores constitutivos - 21 Promotores tecido-específicos - 22 O gene a ser expresso - 22 Genes marcadores - 23 Genes repórteres - 23 Genes de seleção - 24 Sequência terminadora da transcrição - 24 Construção do gene quimérico - 25
3 - Métodos para a transformação genética de plantas Transformação indireta - 29 Transformação indireta via Agrobacterium spp. - 29 Transformação indireta via vírus - 37 Transformação direta - 38 1. Métodos físicos - 38 1.1. Biobalística - 38 1.2. Microinjeção de DNA - 39 1.3. Eletroporação de protoplastos - 40 1.4. Lipossomos - 40 1.5. Transformação via pólen - 41 1.6. Transformação mediada por ultrassom - 42 1.7. Microfibras de carboneto de silício - 43 2. Métodos químicos - 43 2.1. Transferência gênica mediada por PEG (polietilenoglicol) - 43 2.2. Coprecipitação com fosfato de cálcio - 43 2.3. Transferência gênica mediada por dimetilsulfóxido (DMSO) - 44 2.4. Transferência gênica mediada por dietilaminoetil-Dextran (DEAE dextran) - 44 Regeneração e seleção de transformantes - 45
4 - Análise de plantas transgênicas Análise de DNA - 47 PCR - 47 Southern blotting - 49 Análise de RNA - 50 Northern blotting - 50 Análise de proteínas - 50 ELISA - 50 Western blotting - 51
5 - Liberação experimental e comercial de plantas transgênicas Gerações de Organismos Geneticamente Modificados (OGMs) e transgênicos - 55 Primeira geração - 55 Segunda geração - 55 Terceira geração - 56 Equivalência substancial (ES) - 56 Segurança do material genético introduzido - 56 Segurança da proteína expressa pelo gene inserido - 57 Potencial alergênico - 57 Toxicidade - 57 Segurança da composição do alimento - 58 Estudos com animais de grande porte - 58 Resistência a antibióticos - 58 Rotulagem - 59
6 - Os transgênicos e o meio ambiente Fluxo gênico - 61 Transferência horizontal de genes - 61 Possíveis efeitos em organismos não visados - 61 Manejo de variedades tolerantes a herbicidas - 62 Manejo de variedades resistentes a insetos - 62 Utilização de agentes de seleção que não sejam genes de resistência a antibióticos - 63 Utilização de promotores tecido-específicos - 63 Classificação dos experimentos com plantas geneticamente modificadas quanto aos níveis de risco e contenção - 64 Grupo de risco I - 64 Grupo de risco II - 64 Grupo de risco III - 64 Grupo de risco IV - 65 Biossegurança - 65 O papel da Comissão Técnica Nacional de Biossegurança (CTNBio), da Comissão Interna de Biossegurança (CIBio) e a obtenção de Certificado de Qualidade em Biossegurança (CQB) - 66 Classes de risco - 67 Classe 1 - 67 Classe 2 - 67 Classe 3 - 67 Classe 4 - 68
7 - Os transgênicos no Brasil: situação e perspectivas